EFEK PAPARAN PROGESTERONE TERHADAP EKSPRESI TIROSIN HIDROKSILASE DAN AKTIFITAS LOKOMOTOR, SERTA PENGARUHNYA TERHADAP KADAR AROMATASE-B PADA EMBRIO ZEBRAFISH (Danio rerio)
DOI:
https://doi.org/10.21776/ub.majalahkesehatan.2019.006.04.1Keywords:
aromatase B, progesterone, tirosin hidroksilase, zebrafishAbstract
Selain berperan dalam sistem reproduksi, progesterone juga mempunyai peran dalam sistem saraf. Progesterone diketahui berperan dalam proses perkembangan sel Purkinje pada tikus. Sel dopaminergik mempunyai peran penting dalam tubuh khususnya fisiologi pergerakan. Perubahan konsentrasi dopamin dapat berakibat pada timbulnya kelainan seperti Parkinson dan amyotropik lateral sklerosis. Pada zebrafish, sel dopaminergik dapat diidentifikasi dengan pengamatan pada tirosin hidroksilase dan pengamatan aktifitas pergerakan dapat dilakukan penilaian aktifitas lokomotor. Pemahaman terhadap hal ini akan membantu upaya terapi penyakit-penyakit neurodegeneratif terkait dopamin.Tujuan penelitian ini adalah membuktikan pengaruh progesterone pada sel saraf dopaminergik embrio zebrafish melalui pengamatan ekspresi tirosin hidroksilase, aktifitas lokomotor dan peran progesterone dalam regulasi estrogen melalui aromatase B. Sebanyak 30 embrio zebrafish dipelihara dan dikultur dalam cawan dengan terpapar progesterone pada medium dengan konsentrasi 0,1, 1, dan 10 µM. Penelitian diulang tiga kali menggunakan masa peneluran yang berbeda. Teknik imunositokimia dengan marker fluoresens digunakan untuk mengamati perubahan ekspresi tirosin hidroksilase pada diensefalon saat 48 hpf. Pengukuran aktifitas lokomotor dilakukan dengan kuantifikasi gerakan larva selama 1 menit pada usia 144 hpf. Ekspresi mRNA aromatase B dinilai dengan metode RT-PCR menggunakan primer Arom-B pada usia 48, 72, dan 96 hpf. Analisis statistik menggunakan ANOVA dengan nilai p < 0,05. Progesterone menurunkan ekspresi tirosin hidroksilase pada daerah diensefalon embrio zebrafish. Progesterone terbukti menurunkan aktifitas lokomotor larva. Paparan progesterone menyebabkan peningkatan ekspresi mRNA aromatase B terutama pada usia 72 hpf dan 96 hpf. Kesimpulannya, progesterone dapat mempengaruhi sel dopaminergik embrio zebrafish melalui penekanan ekspresi tirosin hidroksilase, aktifitas lokomotor, dan meningkatkan ekspresi mRNA aromatase B.
References
Zheng P. Neuroactive Steroid Regulation of Neurotransmitter Release in the CNS: Action, Mechanism and Possible Significance. Progress in Neurobiology. 2009; 89:134-152.
Diaz NF, Diaz-Martinez NE, Velasco I, Camacho-Arroyo I. Progesterone Increases Dopamine Neuron Number in Differentiating Mouse Embryonic Stem Cells. J Neuroendocrinol. 2009; 21(8): 730-736.
Roos R.Huntington’s Disease: a Clinical Review. Orphanet Journal of Rare Diseases. 2010; 5: 40.
Filippi A, Mahler J, Schweitzer J, Driever W. Expression of the Paralogous Tyrosine Hydroxylase Encoding Genes th1 and th2 Reveals the Full Complement of Dopaminergic and Noradrenergic Neurons in Zebrafish Larval and Juvenile Brain. The Journal of Comparative Neurology. 2010; 518: 423-438.
Kabashi E, Brustein E, Champagne N, Drapeau P. Zebrafish Models for the Functional Genomics of Neurogenetic Disorder. Biochimica et Biophysica Acta. 2011; 1812(3):335-45.
Chen Q, Huang N, Huang J, Chen S, Fan J, Li C, Xie F. Sodium Benzoate Exposure Downregulates the Expression of Tyrosine Hydroxylase and Dopamine Transporter in Dopaminergic Neurons in Developing Zebrafish. Birth Defect Research Part B. 2009; 86: 85-91.
Fatimah R and Kishida M. Estrogen Regulates Motility through Dopamine Signaling in Early Development of Zebrafish (Danio rerio). 2010.
